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地塞米松對(duì)蛋清誘發(fā)大鼠足跖腫的影響實(shí)驗(yàn)——周長(zhǎng)法

山東朱氏藥業(yè)集團(tuán)有限公司2022/11/7 21:18:39

2019.4.091174實(shí)驗(yàn)方法原理異體蛋白進(jìn)入機(jī)體后可在短時(shí)間內(nèi)引起組織的急性炎癥反應(yīng)，發(fā)生炎癥的部位明顯腫脹、體積增大。腎上腺皮質(zhì)激素可通過(guò)多種方式明顯抑制**致炎因素引起的炎癥，從而改善紅、腫、熱、痛等癥狀。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)測(cè)定大鼠踝關(guān)節(jié)腫脹程度，觀察炎癥的發(fā)生及地塞米松的抗炎作用。實(shí)驗(yàn)材料大鼠試劑、試劑盒地塞米松磷酸鈉生理鹽水雞蛋清吲哚美辛混懸液儀器、耗材容積測(cè)量裝置注射器天秤軟尺線棉手套記號(hào)筆大鼠固定器鼠籠灌胃針燒杯實(shí)驗(yàn)步驟一、周長(zhǎng)或測(cè)量法




⒈  取禁食過(guò)夜、體重相近的雄性大鼠3只，稱重并分別以不同記號(hào)標(biāo)記甲鼠、乙鼠、丙鼠，每只大鼠生理鹽水5 ml灌胃，以**大鼠體內(nèi)水分相同。




⒉  甲鼠腹腔注射0.5％地塞米松磷酸鈉注射液5 mg/Kg（0.5％溶液1 ml/Kg）、乙鼠灌胃給予1％吲哚美辛混懸液10 mg/Kg（1％混懸溶液1 ml/Kg）、丙鼠腹腔注射生理鹽水1 ml/Kg。于左或右后肢的踝關(guān)節(jié)處用沾有油漆的絲線作一圓周形標(biāo)記，再用絲線繞標(biāo)記測(cè)量周長(zhǎng)或厚度千分尺測(cè)量厚度兩次。30 分鐘后，在大鼠左或右后足掌腱膜下向踝關(guān)節(jié)周圍用5 號(hào)針頭注入新鮮雞蛋清0.1ml，以后每隔10 分鐘測(cè)量大鼠左或右后踝周長(zhǎng)或厚度，連測(cè)6次，用致腫前后左后踝周長(zhǎng)厚度之差，作為踝關(guān)節(jié)腫脹程度。




二、容積法




⒈  取禁食過(guò)夜、體重相近的雄性大鼠3只，稱重并分別以不同記號(hào)標(biāo)記甲鼠、乙鼠、丙鼠，每只大鼠生理鹽水5 ml灌胃，以**大鼠體內(nèi)水分相同。




⒉  甲鼠腹腔注射0.5％地塞米松磷酸鈉注射液5 mg/Kg（0.5％溶液1 ml/Kg）、乙鼠灌胃給予1％吲哚美辛混懸液10 mg/Kg（1％混懸溶液1ml/Kg）、丙鼠腹腔注射生理鹽水1 ml/Kg。于左或右后肢的踝關(guān)節(jié)處用沾有油漆的絲線作一圓周形標(biāo)記，以排水法測(cè)量大鼠左后足之正常容積（以ml 表示）。30 分鐘后，在大鼠左后足掌腱膜下向踝關(guān)節(jié)周圍注入新鮮雞蛋清0.1 ml，以后每隔10 分鐘測(cè)量大鼠左后踝容積，連測(cè)6 次，用致腫前后左后踝容積之差，作為踝關(guān)節(jié)腫脹程度。




⒊  排水法操作步驟：




⑴轉(zhuǎn)動(dòng)三通活塞D，使 A與B相通。將水推到吸管“O”處，接著關(guān)閉B，使A 與C相通。




⑵注射器的水推完，使玻管C 內(nèi)液面與其刻度圈平齊（玻管C 內(nèi)水量多少可用滴管直接調(diào)節(jié)）。




⑶每次測(cè)量位置相同，可用記號(hào)筆或黑漆在實(shí)驗(yàn)大鼠左后踝關(guān)節(jié)劃一標(biāo)記，然后將左后肢拉直置入玻管C內(nèi)，抽動(dòng)注射器針芯，使左后肢標(biāo)記處與玻管C上的刻度相平。待玻管C內(nèi)液面與其刻度相平時(shí)，立即關(guān)閉C，使A與B相通，隨即取出大鼠后肢。




⑷將注射器內(nèi)剩余液體**推入吸管B，記錄水柱高度。此時(shí)吸管B 內(nèi)顯示的水柱高度即代表所測(cè)踝關(guān)節(jié)腫脹程度的容積。




三、結(jié)果










將實(shí)驗(yàn)室各組實(shí)驗(yàn)結(jié)果算出平均值，以橫坐標(biāo)表示時(shí)間（分），縱坐標(biāo)表示關(guān)節(jié)腫脹周長(zhǎng)或容積，繪制成坐標(biāo)圖。展開 注意事項(xiàng)⒈  周長(zhǎng)或厚度測(cè)量法：測(cè)量周長(zhǎng)的軟皮尺不能有彈性，刻度以0.2 mm左右為宜，測(cè)量部位盡量少移動(dòng)，每次測(cè)量的寬緊度必須一致。測(cè)量動(dòng)作要熟練，要由專人負(fù)責(zé)，盡量減少誤差。注射致炎劑時(shí)，實(shí)驗(yàn)者應(yīng)將動(dòng)物后肢拉直，先自跖中部皮下向上注入一部分，然后掉轉(zhuǎn)針頭向下注完。




⒉  容積法：在每一次測(cè)量之前，都要調(diào)節(jié)C和B的零點(diǎn)，若因大鼠肢體帶走部分水分，則必須把水補(bǔ)充到玻管C的刻度處，再按上述順序測(cè)量。